货号 | 4060S |
反应种属 | Human/Mouse/Rat/Hamster/Monkey/D.melanogaster/Zebrafish/Bovine |
来源宿主 | Rabbit |
应用 | W/IP/IHC-P/IHC-F/IF-IC/F |
使用方法 | WB(1:2000) IP (1:50) IHC-P (1:50) F (1:100) IF-IC (1:200) IHC-F (1:50) |
供应商 | CST |
背景 | Akt,又被称为PKB 或 Rac,在细胞的生长和凋亡中起到关键作用(1-3)。被胰岛素(insulin)或各种生长及存活因子激活后,这个激酶在包括PI3K在内的对wortmannin敏感的通路中起作用(2,3)。磷脂结合可以调控Akt的激活,其苏氨酸308位点被PDK1环磷酸化(4),并且在该蛋白碳链末端丝氨酸(473)位点磷酸化。以前研究认为PDK2在丝氨酸473位点磷酸化Akt,实际为哺乳类动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR,mammalian target of rapamycin),其存在于包含rictor 和Sin1 的雷帕霉素非敏感复合体中。Akt促进细胞的生长通过抑制细胞的凋亡 ,例如Akt可以抑制下游靶蛋白Bad (7), forkhead 转录因子 (8), c-Raf (9), and caspase-9。PTEN 磷酸酶是抑制PI3 激酶/Akt信号通路的主要蛋白(10)。 LY294002是特异的 PI3 激酶的抑制剂(11)。Akt 的另外一个主要功能是通过磷酸化和抑制GSK-3α 和 β调控糖原的合成(12,13)。Akt 也可以调控insulin诱导的葡萄糖转运 (12)。除此之外,Akt还可以调控细胞周期,通过抑制GSK-3β,从而调控其下游的cyclin D1 的磷酸化和降解 (14),或者负向调控cyclin依赖的激酶抑制因子 p27 Kip (15) and p21 Waf1/CIP1 (16)。Akt 也可以通过直接磷酸化mTOR,以包含raptor的雷帕霉素敏感复合体调控细胞的生长(17)。更重要的是,Akt磷酸化和抑制TSC2, 而TSC2在 mTOR-raptor 复合体中是mTOR的抑制因子(18,19)。 |
存放说明 | -20C |
计算分子量 | 60 |
western blot方法检测细胞提取物:未处理和LY294002/wortmannin处理的PC-3细胞,血清饥饿和PDGF处理的NIH/3T3 细胞。使用的抗体为 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb(上图) 和 Akt (pan) (C67E7)Rabbit mAb #4691 (下图). | |
激光共聚焦荧光法检测C2C12 细胞, 左图为LY294002处理的,右图为胰岛素处理的 ,检测抗体为Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb,呈绿色。蓝色伪彩为DNA荧光染料(产品信息为 DRAQ5®#4084 )。 | |
免疫组织化学方法检测石蜡包埋的U-87MG 异种移植物,左图为未处理的,右图为lambda磷酸酶处理的,使用的抗体为 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb。 | |
免疫组织化学方法检测石蜡包埋的异种移植的MDA-MB-468 ,使用抗体为Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb (左图) 和 PTEN (138G6) Rabbit mAb #9559 (右图)。显示磷酸化AKT在PTEN缺陷的MDA-MB-468细胞中阳性染色。 | |
免疫组织化学方法检测石蜡包埋的人肺癌组织,使用的抗体为 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb。 | |
免疫组织化方法验证Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb抗体,使用的切片为SignalSlide® Phospho-Akt (Ser473) IHC Control#8101(石蜡包埋的LNCaP细胞),左图为未处理的LNCaP细胞,右图为LY294002处理的LNCaP细胞。 | |
免疫组织化学方法检测石蜡包埋的人乳腺癌组织,使用的抗体为 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb。 | |
免疫组织化学方法检测石蜡包埋的PTEN杂合突变小鼠子宫内膜组织,使用的抗体为 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb。(组织切片由Dr. Sabina Signoretti, Brigham and Womens Hospital, Harvard Medical School, Boston, MA.馈赠) | |
流式细胞方法检测未处理的和LY294002,wortmannin 和 U0126 处理的Jurkat细胞,绿色为未处理组,蓝色为处理组,红色为非特异结合的阴性对照。使用抗体为 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb。 | |
免疫组织化学方法检测石蜡包埋的人乳腺癌组织,左图使用的是SignalStain® Antibody Diluent (抗体稀释液),右图使用的是TBST/5% normal goat serum (正常山羊血清),使用的抗体是Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb #4060。 | |
免疫组织化学方法检测冰冻SKOV3异种移植物,使用的抗体为 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb。 |