| 货号 | 150052 | |||||||||||||
| 简介 | 从细胞和有限的样本中同时扩增全基因组和全转录组 | |||||||||||||
| 描述 | Performance 完整覆盖基因组和转录组，实验可靠REPLI-g Cell WGA & WTA Kit包含新颖的REPLI-g SensiPhi DNA Polymerase，以及用于从25–1000个细胞或相当量的样本中同时扩增全基因组扩增和全转录组的优化缓冲液和试剂。经过高效的细胞裂解后，（彻底去除基因组DNA，之后进行灵敏的逆转录），该试剂盒采用多重置换扩增（MDA）技术完整地、无偏差地扩增基因组DNA和cDNA（参见Multiple Displacement Amplification (MDA) technology）。扩增的gDNA和cDNA可以在各种下游应用中使用（参见REPLI-g amplified cDNA and gDNA perform like gDNA in downstream experiments）。适用于多种研究领域REPLI-g Cell WGA & WTA Kit 可以直接从细胞中有效扩增gDNA和cDNA，并且可以与经常在临床研究分析中出现的各种样本一起使用，包括肿瘤细胞、干细胞、分选细胞或其它小量样本（参见下表）。
Principle REPLI-g Cell WGA & WTA Kit专门用来从少量样本中同时扩增基因组DNA和总RNA，可实现基因组与转录组直接关联。转录调节受基因组对环境的反应所驱动。基因组中的突变和变异，例如点突变和拷贝数或结构的变化，会导致各种物种内或生物体内（例如，嵌合体组织和癌症）形成不同基因组。部分基因组变异可能对细胞或机体调节具有较低影响力。其他变异则可能对转录调节具有很大的影响并最终反映到生理机能上。由于组织的复合结构，对转录本基因型变化的直接结果分析只能通过那些由相同细胞组成的非常小量的样本进行。REPLI-g Cell WGA & WTA Kit可以对整个基因组和转录组进行高度均一的扩增，并且序列偏差可以忽略不计。本试剂采用多重置换扩增（MDA）技术，该技术利用一种可复制高达70 kb的片段而无需解离DNA模板的独特的、连续DNA聚合酶进行gDNA/cDNA恒温扩增（参见Multiple Displacement Amplification (MDA) technology）。 REPLI-g Cell WGA & WTA Kit独特的构成
Procedure 遗传分析往往需要大量的gDNA和cDNA，这对经常遇到的样本量少是个挑战。无法对少量样本进行基因组状态和转录模式相关性分析。全基因组扩增和全转录组的同时扩增可以克服DNA或RNA量少的限制，可对一个只含有少量细胞的样本进行分析。简单的反应设置，合理而简单的处理步骤，处理时间只需20分钟，完整的gDNA和RNA同时扩增总反应时间只有4小时，这使得REPLI-g Cell WGA & WTA Kit的操作步骤简单和可靠。REPLI-g Cell WGA & WTA Kit包含用于以下反应的试剂（参见REPLI-g Cell WGA & WTA Kit procedure）：
Applications REPLI-g Cell WGA & WTA Kit允许从一个非常小量的样本开始对全部转录物和基因组进行均一的平行扩增。利用该试剂进行的gDNA和cDNA平行扩增非常适用于二代测序技术（包括DNA-Seq和RNA-Seq*）、芯片分析、基因分型检测应用、或定量PCR。REPLI-g Cell WGA & WTA Kit适用于扩增： 转录组（RNA）:
* 如果要进行二代测序，则应了解超过90％的片段来自于rRNA；因此，转录组测序前必须进行总RNA扩增。如扩增富集mRNA（poly A +）RNA时省略反应中的随机引物，rRNA的扩增反应则不会发生。 |
| 说明书 |
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| 供应商 | Qiagen |