| 货号 | 805925 |
| 简介 | 提供对少量或珍稀样本进行高度均一的全基因组扩增和结果评估的服务 |
| 描述 | Performance 可通过两种方法进行全基因组扩增：基于PCR的扩增方法，或多重置换扩增（MDA）。基于PCR的方法可能生成非特异性产物，无法覆盖所有位点，长度不足1 kb的产物DNA无法用于很多下游应用。相反，REPLI-g利用多重置换扩增技术，可高度均一的扩增全基因组，序列偏差小（参见"Highly representative amplification"和"Consistent and accurate whole genome amplification"）。产物一般长于10 kb，在2 kb–100 kb之间（参见"Uniform yield of high molecular weight DNA"）。REPLI-g扩增得到的DNA适用于复杂的限制性酶切分析和多种PCR反应。Principle REPLI-g技术提供高度均一的全基因组扩增，并可最大程度减小序列误差。这种方法基于MDA技术（参见"Schematic representation of REPLI-g amplification"），采用独特的DNA聚合酶进行等温基因组扩增，无需进行分离，可获得多达100 kb的DNA产物。DNA聚合酶具有3→5外切酶校对活性，可在复制过程中维持高保真性，在抗外切酶的引物存在时用于获得高产量的DNA产物。扩增得到的DNA可即用于多种下游应用，包括基因分型（如：SNP、STR[参见"Accurate genotyping"]和微阵列分析）、终点法PCR、real-time PCR和测序。Procedure 使用100 ng起始模板可获得理想结果。但是，不同的模板量均可扩增得到均一的DNA产量。首先加入裂解缓冲液，裂解样本，DNA变性（高度降解的基因组DNA不适合做扩增模板）。温和的碱变性可实现均一的全基因组扩增，序列偏差小。中和后，加入含有缓冲液的预混液（包括抗外切酶的引物、DNA聚合酶和蒸馏水）。在30°C过夜孵育，进行全基因组扩增反应。这一简便、高效的技术可准确扩增全基因组。 DNA扩增完成后，使用专有的特定位点分析技术评估序列偏差，该技术可灵敏检测模板DNA的质量。严格的质量控制提供扩增后的DNA的质量信息，确保您可靠的预测下游检测成功的可能性（参见"Detailed quality assessment report"）。 Applications REPLI-g扩增得到的基因组DNA适合多种下游应用，包括：
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| 供应商 | Qiagen |