货号 | 970460 |
简介 | 基于序列定量分析KRAS基因中的突变 |
描述 | Principle KRAS Pyro Kit用于实时定量检测人KRAS基因编码子12、13和61的突变,在PyroMark Q24 System上使用焦磷酸测序技术检测。KRAS基因编码一种在EGFR信号通路中有重要作用的蛋白。KRAS基因的突变会影响该蛋白对下游通路的激活。所有癌症中将近30%发生KRAS基因突变,其中直肠癌(35%)和肺癌(18%)。 可检测以下种类的突变:
Procedure 该试剂盒包含2部分实验:一个用于检测编码子12和13的突变;另一个用于检测编码子61的突变(参见"Illustration of the KRAS assay"和"Pyrogram trace of a normal genotype in codons 12 and 13")。运用PCR技术对这两个片段分别进行扩增,测定特定区域的核酸序列。使用该法进行定量和定性分析时,特定区域周围的核酸序列峰被视为标准峰和参照峰。使用针对编码子12/13和编码子61的引物对两个片段PCR扩增后,将扩增子固定在高性能链霉素亲和琼脂糖上。将单链DNA和相应序列的引物退火处理得到DNA。然后在PyroMark Q24 System上设置程序和运行程序对样品进行分析。推荐使用KRAS Plug-in Report进行分析。该报告确保使用正确的LODs和分析的不同序列可自动检测所有突变。也可在PyroMark Q24 System上使用其他分析工具进行分析(参见"Pyrogram trace of a GGT to GAT mutation in base 2 of codon 12")。运行后可以通过调节"Sequence to Analyze"来检测稀有突变(参见"Pyrogram trace of a GGT to TGT mutation in base 1 of codon 12"和"Pyrogram trace of the reanalysis of the sample in the previous figure")。 Applications KRAS Pyro Kit确保准确定量突变分析,适用于各种研究领域,包括癌症和表观遗传学研究。该试剂盒用于检测人KRAS基因编码子12、13和61常见的突变。 可检测以下种类的突变:
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说明书 |
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供应商 | Qiagen |