货号 | 970470 |
简介 | 基于序列定量检测BRAF基因中的突变 |
描述 | Principle BRAF Pyro Kit在PyroMark Q24实时定量焦磷酸序列分析仪上采用焦磷酸测序技术实时定量检测人BRAF基因中编码子600和编码子464–469的突变。BARP基因编码了v-raf鼠类肉瘤病毒癌基因homolog B1激酶,一种EGFR下游的原癌基因。研究发现,在所有癌症患者中有6–8%表现出BRAP基因的突变,在黑素瘤(50–60%)、结肠癌(10%)、甲状腺癌(39%)中BRAP基因突变则更为频繁。将近90%是V600E突变。 Procedure 该试剂盒包含2部分实验:一个用于检测编码子600的突变,另一个用于检测编码子464–469的突变(参见"Illustration of the BRAF assay")。运用PCR技术对这两个片段分别进行扩增,测定特定区域的核酸序列。使用该法进行定量和定性分析时,特定区域周围的核酸序列峰被视为标准峰和参照峰。 使用针对编码子600和编码子464–469的引物对两个片段PCR扩增后,将扩增子固定在高性能链霉素亲和琼脂糖上。将单链DNA和相应序列的引物退火处理得到DNA。然后在PyroMark Q24实时定量焦磷酸序列分析仪上设置程序和运行程序对样品进行分析(参见"Pyrogram trace of a normal genotype in codon 600","Pyrogram trace of a normal genotype in codons 464-469"和"Pyrogram trace of a GTG to GAG mutation in base 2 of codon 600")。运行后可以通过调节"Sequence to Analyze"来检测稀有的突变。 Applications BRAF Pyro Kit用于检测人BRAF基因中编码子600和编码子464–469的突变。 |
说明书 |
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供应商 | Qiagen |