| 货号 | 59110 | ||||||||||||
| 简介 | 亚硫酸氢盐的完全转化和DNA回收，用于甲基化分析 | ||||||||||||
| 描述 | Performance 快速得到实验结果完整的EpiTect离心和真空过程只需6小时，包括从DNA到待分析的亚硫酸氢盐转化后的高纯DNA。EpiTect 96 Bisulfite操作时间少于7小时。传统的亚硫酸氢盐转化过程需要18个小时，且需要大量的操作(参见"快速简单的亚硫酸氢盐转化"和"Time saving procedure")。EpiTect Bisulfite Kit为成功进行亚硫酸氢盐转化和DNA回收提供所需的全部试剂。
完全的DNA转化每个EpiTect Bisulfite Kit可以相同的效率转化低至1 ng到2 µg DNA。全新的实验步骤和优化的缓冲液可回收得到高产量的转化DNA。当通过real-time PCR扩增经转化的DNA时，低CT值的实验结果显示了高效的胞嘧啶转化(参见"Complete cytosine conversion")。对转化的DNA的分析显示，EpiTect Bisulfite Kit可转化超过99%的非甲基化的胞嘧啶(参见"Highly efficient cytosine conversion")。高转化率确保了高重复性和可靠的下游分析结果。 Principle 特殊样本的亚硫酸氢盐转化从珍稀样本和少量样本（如：福尔马林固定、FFPE石蜡包埋或显微切割组织）中确定甲基化模式，由于DNA的量很少，实验尤其困难。但是这些样本类型是成功鉴定有价值的疾病，预测生物标记物的专门研究对象。 EpiTect Bisulfite Kit 为这些类型的样本提供优化的操作流程，从而解决了难题（参见"Methylation detection from FFPE tissue samples"）。该试剂盒含有实验所需的全部缓冲液和试剂，只需少量的手动操作。 对于从FFPE样本、细胞、血液及组织中直接进行亚硫酸氢盐转化而无需预先分离DNA，我们推荐使用EpiTect Plus FFPE Bisulfite Kit和EpiTect Plus LyseAll Bisulfite Kit。 防止DNA降解DNA保护缓冲液采用独特的配方，防止DNA过度降解（在高温、低pH值条件下使用亚硫酸氢盐处理DNA时经常出现严重的DNA降解），并实现有效的DNA变性，从而产生完全转化为胞嘧啶时所需的单链DNA（参见"Unique DNA Protect Buffer and pH indicator system"）。防止DNA降解的发生可以保证后续大PCR片段的扩增和分析（参见"Fast and easy bisulfite conversion"）。DNA保护缓冲液含有PH指示剂染料，从而可保证用于胞嘧啶转化的正确的pH条件。有效的完整DNA回收可保证转化后的DNA至少保存12个月而不影响DNA的质量（参见"Long-term DNA storage"）。 Procedure EpiTect Bisulfite操作流程基于QIAGEN简单直接的结合、洗涤和洗脱体系，仅需几个简单的步骤（参见"Conversion procedure"）。DNA经过热变性和亚硫酸氢盐转化后，被上样到EpiTect离心柱或96孔板上，使用优化的缓冲液和标准化的离心步骤或真空装置，洗去所有的亚硫酸氢钠并洗脱DNA。洗脱的DNA可用于各种下游应用，如：甲基特异性PCR、real-time PCR分析、亚硫酸氢盐转化后测序（bisulfite sequencing）、结合亚硫酸氢盐的限制性内切酶法分析（COBRA）和焦磷酸测序（Pyrosequencing）。 表观遗传学信息对于生物医学研究（尤其是肿瘤学）、干细胞研究以及发育生物学等领域都非常重要。但是分析DNA甲基化的变化目前仍具有挑战性，因为缺乏标准化的方法可从有限的样本中得到可重现性的数据。QIAGEN推出新的表观遗传学解决方案，使样本分析前处理到分析整个过程实现标准化，即从DNA样本收集、稳定和纯化，到亚硫酸氢盐转化和real-time或终点式PCR甲基化分析或测序（参见"Standardized workflows in epigenetics"）。 Applications 经EpiTect Bisulfite Kit转化和纯化的DNA适用于多种下游应用，如：
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| 说明书 |
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| 供应商 | Qiagen |