货号 | 335452 |
简介 | 采用MethylScreen技术为EpiTect Methyl II PCR Arrays和EpiTect Methyl II PCR Assays制备基因组DNA样品 |
描述 | Principle EpiTect Methyl II DNA Restriction Kit制备基因组DNA样品用于DNA甲基化分析,使用EpiTect Methyl II PCR Assays和EpiTect Methyl II PCR Arrays对单独或一组已知的或预测的甲基化CpG岛进行甲基化分析。采用试剂盒中含有的酶和缓冲液获得4种降解产物以检测不同的甲基化DNA片段。模拟降解产物(Mo)包含所有的内源性基因组DNA 。甲基化敏感限制性内切酶(酶A)降解产物(Ms)包含高度甲基化DNA序列,而甲基化依赖性限制性内切酶(酶B)降解产物(Md)包含非甲基化DNA序列。双重降解产物(Msd)检测两种酶降解产物的背景和可行性。 Procedure 将等量基因组DNA样品加入到4个不同的离心管中并加入缓冲液和限制性内切酶。模拟降解产物(Mo)无需加酶;酶A加入到甲基化敏感限制性内切酶降解产物(Ms)中;酶B加入到甲基化依赖性限制性内切酶降解产物(Md)中。两种酶都加入到双重降解产物(Msd)中。所有的降解产物都在37°C孵育6小时或整夜。最后将酶在65°C加热20分钟进行失活处理。 为了得到较好的结果,EpiTect Methyl II DNA Restriction Kit应与EpiTect Methyl II PCR Arrays和EpiTect Methyl II PCR Assays联合使用,以分析每个样品每次降解的DNA的量并检测基因启动子或其他甲基化的目标DNACpG岛甲基化状态。将降解产物在RT2SYBR® Green Mastermix中稀释,再分成小份放入阵列孔中。或者是将降解产物分成小份装入不同的含有RT2SYBR® Green Mastermix的real-time PCR管中。最后,采用推荐的循环程序进行分析。 Applications EpiTect II DNA Methylation Enzyme Kit是EpiTect Methyl II PCR产品线中的一部分,是一种创新技术和多用型工具,用于:
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说明书 |
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供应商 | Qiagen |