| 货号 | 336831 | ||||||||||||||||||||||||||
| 简介 | 用于灵敏检测各种哺乳动物细胞的信号活性 | ||||||||||||||||||||||||||
| 描述 | Principle 每个芯片采用转导即用型管规格，含有10个Cignal Lenti Reporter Assays和2个对照。Cignal Finder Lenti Reporter Arrays独特的整合了转录因子报告基因技术和慢病毒技术。 Cignal Finder Lenti Reporter Arrays含有多拷贝的特定转录因子结合部位和基本的启动子元件，可表达报告基因（萤火虫荧光素酶）。 慢病毒是将含报告基因的载体转入大部分哺乳动物细胞（包括未分化细胞）的有效工具。转导的慢病毒报告基因载体与细胞基因组DNA整合，可稳定、长期表达报告基因。 这些报告基因是功能基因组学和药物研发的有力工具，可检测通路活性。当候选药物、基因敲除（使用siRNA）、过表达（使用表达载体）或多肽激活或抑制通路时，荧光素酶或报告基因的活性被调控，并能被快速、定量检测。 安全性Cignal Lenti Reporter Assays是转导即用型、不能复制的、基于HIV的VSV-G假型慢病毒颗粒（参见"Cignal Lenti Reporter Assay"）。Cignal慢病毒颗粒使用安全。推荐按照Risk Group Level 2 (RGL-2)生物进行处理。遵守所有发行的RGL-2准则进行操作和废物净化。建造BSL-2工作条件的详细要求可参见U.S. Department of Health and Human Services出版的Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories，第4版。 这些载体经设计改造后具有以下生物安全特征：
Procedure Cignal Finder Lenti Reporter Arrays可直接转导，无需构建或扩增慢病毒。这些载体非常适合对难转染细胞瞬时转导或制备通路传感细胞株（参见"Cignal Lenti Reporter procedure"）。 操作流程包括3个简单的步骤：
难转染细胞株的瞬时通路调控研究使用Cignal Lenti Reporter Assay转导目标细胞。细胞通常培养24–48小时，以确保慢病毒整合。再用相应的生物试剂处理（siRNA、shRNA、化合物、病毒表达载体、蛋白或多肽）。根据处理条件，处理后18–36小时进行报告基因检测（萤火虫荧光素酶或GFP）。 制备稳定的通路传感细胞株使用Cignal Lenti Reporter Assay转导目标细胞。转导后，细胞用嘌呤霉素筛选，形成转导细胞的纯细胞群落。如果必要，可挑选单细胞克隆，进而分离通路传感细胞株。这些通路传感细胞株可作为有用的细胞分析平台，用于后续筛选和机理研究。 Applications Cignal Finder Lenti Reporter Arrays适用于功能基因组学和药物研发，可检测各种哺乳动物细胞的信号活性。非常适合检测siRNAs、蛋白和小分子化合物的生物效应。 |
| 说明书 |
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| 供应商 | Qiagen |